服务
固定,加工和嵌入
固定
芯材采用10%中性缓冲福尔马林作通用固定剂。对于常规样品,组织应在10%中性缓冲福尔马林中固定24-48小时,然后转移到70%乙醇中进行处理。
处理
核心通常使用自动组织处理器和协议,该协议设计用于处理不同尺寸的组织。核心还可以处理诸如小鼠胚胎和幼崽的手工过程样本,并根据要求定制处理特殊或困难的组织。如有必要,样品用含甲酸(J.T.Baker)的Krajian Decalcify溶液脱钙。
嵌入
除非研究人员有其他特殊要求,组织都是用标准的通用方向嵌入的。乐动体育LDsports中国
Microtomy和丧失冻干
切片法
除非另有说明,核心工作人员通常将石蜡包埋组织切片为4 μm。大多数切片放置在带电载玻片上,以获得更好的附着力。切片可用于常规组织学、免疫组化、免疫荧光、DNA分离、原位杂交和激光捕获显微切割。
Cryosectioning
核心工作人员可以从冷冻组织标本中制备冷冻组织,用于常规组织学、免疫组化、特殊染色和激光捕获显微解剖。
原位杂交
我们的原位杂交服务提供超过13000种商业探针,用于检测单分子灵敏度的RNA。我们提供单通道探针、多重分析以及多种物种、组织和基因的分析选项。我们的工艺适用于冷冻、福尔马林固定石蜡包埋和档案组织。与我们的所有服务一样,我们还提供数字成像和图像分析。
单通道成像。在左边,表皮生长因子受体是红色的。在右边,ERBB3它是棕色的。
双工成像。在左边,PD-L1是在水上和CD8是红色的。在右边,PD-L1是在水上和LAG3.是红色的。
常规组织学
初级核心染色剂是Thermo Varistain Gemini。对于苏木精和曙红污渍,核心工人使用鳃-2苏木精和酒精eosin-y(Thermo),其产生一致的结果。每一个染色的幻灯片都是质量控制在核心实验室之前。
苏木精和伊红(H&E)染色的心脏和血细胞
H&E染色上皮细胞放大20倍
H&E染色的上皮细胞放大了40倍
H&E染色肾细胞
特殊污渍
除了常规的组织学染色之外,核心还可以使用特殊污渍,例如richrome,用于区分结缔组织,对脂质和脂肪的油红O,糖胆碱和其他多糖的胭脂红,以及许多其他染色方案。
心脏的三色(三种颜色)染色
胭脂红染色的乳腺
心脏和主动脉油红O染色
细胞凋亡检测
活性Caspase-3和切割的液体裂解液体可用于检测经受编程的细胞死亡的给定组织样品中的细胞数。
组织取样和整体安装服务
核心工作人员将根据需要使用肉眼技术或立体镜采集和固定任何组织。整体安装技术允许在更大的背景下观察结构。例如,整个前列腺,不同于前列腺切片,它提供了这个器官管状结构的完整概述。同样,整个乳腺可以很容易地评估整个乳腺的表型变化。
免疫组织化学
组织学实验室执行自动和手动免疫染色,并使用标准的三步比色免疫组织化学检测系统或基于聚合物的两步过氧化物酶系统对福尔马林固定的石蜡包埋组织切片进行常规染色,这有助于避免内源性生物素染色。核心还使用一种敏感的、基于酪酰胺的信号放大系统,在需要时增强免疫组织化学染色。核心还可以开发用于冷冻组织切片以及粘附在玻片上的培养细胞的方案。当福尔马林固定的组织无法检测到抗原时,核心员工可以使用冷冻组织和其他固定方法制定新方案。
自动免疫染色
core的自动免疫染色机有助于满足core服务不断增长的需求,并有助于标准化常用的免疫染色。Biocare intelliPATH免疫染色机上常规运行的几种抗体的优化、自动化方案包括:
- 增殖标记物:5-溴-2'脱氧尿苷(BrdU), Ki-67, PCNA
- 分化标志物:角蛋白1、5、6、8、10、13和14、S100 A8、S100 A9
- 细胞周期相关蛋白质:细胞周期蛋白D1,E2F1,P27,P21
- 癌基因和肿瘤抑制基因:Rb,p53
- 标记蛋白:FLAG, B-gal
人工免疫染色与新方案开发
一台机器永远无法完全取代熟练的技术人员。数量有限的抗体和需要特别注意的人将始终用手染色。核心人员已经重大努力扩大可以在核心中测定的抗原的数量。已经为超过500种抗体开发了方案。一些最新的测定检测磷酸化蛋白(p-akt,p-stat-3,p-rb,p-s6和p-mtor),UV损伤的标记物(CPD和6-4 pps),以及人体细胞的标记物/在小鼠中生长的肿瘤。
如果您有新的研究需要,请与中心联系。乐动体育LDsports中国
免疫荧光
除IHC外,核心还提供了使用单一染色或多路复用方案的各种抗体的免疫荧光(IF)染色。我们将大量的荧光染料在手上保持着,并且大多数抗体可用于冷冻组织和福尔马林固定的石蜡包埋组织。与其他染色方法一样,如果可以通过我们的设施进行成像和分析。
联系我们
Jimi Lynn Young,M.S.,M.B.A.,HT(ASCP),QIHC
乐动体育LDsports中国研究实验室经理
实验室电话:512-237-9309
jimilynn@mdanderson.org
弗吉尼亚哈里斯科克雷尔癌症研究中心乐动体育LDsports中国
在德克萨斯大学MD Anderson癌症中心,科学公园,表观遗传学和分子致癌学系
邮寄地址:p.o.Box 389,史密斯维尔,德克萨斯州78957
实际地址:德克萨斯州史密斯维尔公园路1C 1808号,邮编78957