样品要求
DNA隔离
基因组DNA的:
首选长度为0.5 cm至1cm的尾夹,每口井放置一个尾夹在96深井培养板中插入件的底部。或者,耳夹也可以提交,也可以提交在96深井培养板插入件的底部。最重要的是,尾部/耳夹是一致的大小。提交的样品之间的差异应尽可能小。如果一个片段比其他片段小得多,就剪掉其他片段以匹配它。我们使用机器人程序,一致的剪辑大小将有助于确保最终样本的DNA浓度。
基因分型
DNA应该在水中。中等粗制剂可接受。
DNA测序
- 样品必须干净、在水中提交,最好使用校园内可用的纳米滴仪器之一进行定量。
- 引物的浓度应为3pmol/ mol,并且必须提供已知的退火温度,或至少为引物提供一个Tm。
对于ABI 3500上的自动测序:
- 质粒- 400ng的DNA在每次反应最多12磅水。理想的浓度为200ng/ mol。
- PCR产物–每反应100 ng DNA,每反应12μl,产品尺寸可达500 bp。较大的产品需要更多的模板(例如,2000 bp产品需要200 ng)。请在您的订单中注明您产品的尺寸。
蛋白质
蛋白质分析的样品要求将根据所需服务类型而有所不同。强烈建议您咨询MB核心控制器,以确定最佳的蛋白质提取和纯化方法。在大多数情况下,MB核将提取和纯化蛋白质进行分析。MB核心还可以提供蛋白质收集的指导和培训,以及适合的蛋白质提取缓冲液的配方。
哺乳动物组织:对于哺乳动物组织的蛋白质分析,建议采集后立即在液氮中快速冷冻,然后用干冰运送到实验室。
细胞培养:对于细胞培养的蛋白质分析,建议将细胞颗粒置于干冰上,并尽可能多地去除生长介质。
免疫沉淀反应:对于免疫沉淀(IP)后的蛋白质分析,建议仅在4点的湿冰上提交珠o提交分析的蛋白质裂解物应不污染带电分子或离子,如盐、离子洗涤剂和DNA/RNA。
蛋白质储存:所有样品应保存在-80处oC保持高样品质量。
MB核心服务请求
需要请求服务吗?
从iLab开始。
联系我们
弗吉尼亚哈里斯·科克雷尔癌症研究中心乐动体育LDsports中国
德克萨斯大学安德森癌症中心,科学公园
表观遗传学与分子致癌系
邮寄地址:德克萨斯州史密斯维尔市邮政信箱389号,邮编78957
物理地址:1808 Park Road 1C, Smithville, Texas, 78957
沈建军,博士
分子生物学中心主任
表观遗传学与分子致癌学系教授
512-237-9558
jianshen@mdanderson.org