标准后核注射
外国DNA,当注射到受精卵的原子核中时,可以整合到基因组中,得到的小鼠通常将在每个细胞中携带转基因的副本,包括胚芽细胞。掺入基因组中的转基因数量可以在集成的份数和集成方向上变化。
GEMF服务
由调查仪提供并由设施纯化的DNA构建体将被注入受精鼠卵中并转移到寄养女性的输卵管中。产生的幼崽是可能转基因的,并将转移到调查员进行分析。
成本
2,250美元/ MD Anderson调查人员的建筑;3,700美元/ MD Anderson-附属调查人员的建筑;为其他外部调查员提供6,000美元/建筑
经核注射的时间线
- 第1天:微内清除DNA
- 第19天:幼崽出生
- 第33天:调查员通知出生,男性/女性数字。调查员在这次有责任这些小鼠以动物订单形式转向兽医
- 第45天:断奶,将出生的所有幼犬转移到调查员(收到兽医药物的签名订单后)
从GEMF获取服务
- 从研究管理办公室获取动物研究授权(EXT。2-3220的动物协调乐动体育LDsports中国员)。该设施不能在没有授权的动物研究协议号的情况下启动任何实验。乐动体育LDsports中国
- 安排与Jan Parker-Thornburg(713-745-2654或电子邮件预约jpthorn@mdanderson.org.)设置注射日期和关于如何制备质粒DNA的协议
- 证明能够检测基因组DNA背景中感兴趣的单一拷贝。可以在密歇根大学的TAMC中找到确定副本级标准的协议转基因副本标准网站。有关如何将这些标准纳入PCR或Southern分析的协议,请访问PCR分析。
- 登录到https://mdanderson.ilabsolutions.com.,注册帐户,然后转到网站以请求服务
在经核注射和植入后已经完成并且幼崽诞生后,PI必须进行尾部分析并将结果传达给设施。所有幼犬都将被转移到调查员的殖民地。调查人员必须以兽医药物获得并填写动物订单形式,用于动物订单。
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