从囊胚中产生ES细胞
GEMF现在能够从囊胚中产生新的ES细胞系。这项技术将使研究人员能够从他们独特的小鼠品系中获得胚胎干细胞，用于进一步的基因操作或内部测试。
GEMF服务
我们将超越五到10名野生型或纯合的女性（由PI提供），并将它们与调查员提供的男性交配。胚泡将被隔离并生长以获得内部细胞质量。然后将ICM解离以获得ES细胞。ES细胞系通常为分离的约10％的胚泡产生。根据实验，可以将这些系列送入细胞学，然后注入（额外收费）以确定种系传输能力。我们无法保证获得种种传输的成功。但是，我们将与调查员合作，以实现我们最好的能力。
成本
MD Anderson调查员5000美元;MD Anderson-附属调查员为8,200美元;$ 13,284 /适用于其他外部调查人员的建筑
ES细胞生成的时间线
- 第1天：用PMS治疗女性（Gemf，PI提供的纯合）
- 第三天:用绒毛膜促性腺激素(HCG)治疗同样的雌性，并与PI提供的雄性交配
- 第7天：女性被PI员工带到了Gemf Cryo实验室。胚泡从女性的子宫冲洗，并在以前用饲养细胞接种的6cm组织培养板上镀
- 第12天:检查囊胚的生长是否有明显的内细胞团块(ICM)。如果检测到确定的ICM，将其仔细解剖，轻轻胰酶化，并将其放置在96孔板的孔中，该孔之前已播种过喂食细胞
- 在接下来的4到8周:每个井都要仔细监测ES细胞菌落的生长。酶孔被胰蛋白酶化，必要时移到更大的平板上生长。此外，我们将增加2i和3i的准备工作(Li Pet al。2008细胞135:1299 - 1310;应QLet al。2008自然453:519-523)，以促进胚胎干细胞的生长
- 当胚胎干细胞在6厘米的培养皿上生长稳定时，我们将冷冻4瓶细胞(通常在第4-6代)。我们将向PI提供一组细胞，以验证遗传成分，并可以提供细胞遗传学分析的细胞板
- 我们还将把胚胎干细胞注射到胚泡中(额外收费)，如果PI希望确定这些细胞能够进行生殖系传播
从GEMF获取服务
- 安排与Jan Parker-Thornburg的预约（713-745-2654或电子邮件jpthorn@mdanderson.org.）审查项目和实验的基本细节
- 登录到https://mdanderson.ilabsolutions.com，注册帐户，然后转到网站以请求服务