胚泡注射液
小鼠预注入胚胎掺入来自其他胚胎的细胞的能力是产生突变小鼠的基础。因此,当遗传改变的胚胎茎(ES)细胞被微量内注射到小鼠E3.5天胚胎中时,可以获得突变嵌合体。由于ES细胞是多能的并且可以有助于动物的所有细胞类型,包括配子,引入在ES细胞基因组中的遗传改变可以在下一代中脱歌以形成稳定的突变小鼠线。
GEMF服务
基因改性的ES细胞将注射到C57BL / 6或C57BL / 6白化胚泡中。然后将喷射爆炸转回寄养女性的子宫。幼崽诞生大约三周后,设施人员将通知调查人员产生的烟草数量及其百分比斜切位。然后由调查员选择的嵌合体将转移到PI的动物议定书和动物群体。
成本
MD Anderson调查员1,700美元/克隆;MD Anderson-Unfiliated调查员2,363美元/克隆;适用于其他外部调查员的3,830美元/克隆
如果调查人员希望使用在GEMF之外产生的ES细胞(例如:KOMP细胞),我们将在注射之前扩展和测试细胞细胞细胞。该服务的费用为MD Anderson调查员的1,050美元,为MD Anderson-附属调查人员1,722美元,其他外部调查人员为2,790美元。
胚泡注射的时间线
- 第1天:微内注射ES细胞克隆
- 第17天:幼崽出生
- 第31天:调查员通知关于出生,男性/女性数量,嵌合体数量和倒钩的百分比。调查员在这次有责任这些小鼠以动物订单形式转向兽医
- 第38天:Wean Chimeras和转移到调查员(收到兽医签署的订单)
从GEMF获取服务
- 从研究管理办公室获取动物研究授权(EXT。2-3220的动物协调乐动体育LDsports中国员)。该设施无法启动任何实验,没有授权的动物研究协议号乐动体育LDsports中国
- 安排Jan Parker-Thornburg(713-745-2654或电子邮件jpthorn@mdanderson.org.)设置注射日期
- 登录到https://mdanderson.ilabsolutions.com.,注册帐户,然后转到网站以请求服务
在断奶后,嵌合体将转移到调查员,以供随后的育种。调查人员必须以兽医药物获得并填写动物订单形式,用于动物订单。
阅读政策和程序关于GEMF提供的服务的重要信息部分。
笔记:靶向ES细胞克隆的可能性对生物线的贡献高度依赖于注入胚泡中的ES细胞的质量。因此,必须在最佳条件下保持ES细胞,并在整个文化中保持未分化的状态。我们维持拒绝注射分化的细胞的权利,或显示异常特性。