政策和程序
重组DNA实验
由于经核注射和ES细胞电穿孔利用了将独特的DNA序列重组到小鼠基因组中,所以主要调查员需要在开始这些实验之前向GEMF提供来自机构生物安全委员会(IBC)的批准号。
动物用途
在生产任何转基因或嵌合小鼠以及进行存档或辅助生殖(IVF)之前,所有研究人员都需要获得MD Anderson research Compliance的动物研究批准,获得MD Anderson动物护理和使用表格(eACUF)。乐动体育LDsports中国在没有有效的动物使用协议号的情况下,GEMF不能启动任何动物实验。
保密
与实验相关的所有信息将由GEMF完全保密。除非主要调查员另有批准,否则不会与实验相关的知识。
支付
在Bemf启动服务之前需要提交具有批准的图表字符串数量的项目申请表。此表格将在执行时间服务时提交计费。
出版物
MD Anderson转基因鼠标设施部分受到国家癌症研究所的癌症中心支持批准的支持。因此,由GEMF提供的服务产生的所有出版物必须引用确认部分的设施。由GEMF创建的动物产生的所有出版物的副本应提交Jan Parker-Thornburg(遗传学部,单位1010)。
安排
服务将在收到所有相关形式和文档后安排。
实验的具体政策
囊胚注射
在视觉检查它们的形态后,将注射给设施的ES细胞。不会注入状况不佳的细胞,并且可以向调查人员收取收集的胚泡的额外费用。为避免不必要的动物使用,我们要求一周的注意到取消注射日期。对于由GEMF产生的细胞,如果最初的克隆未能给予嵌合体,我们将替代用于注射的交替克隆。对于在GEMF之外产生的细胞,我们将仅保证注射50个胚泡。
基因靶向ES细胞
研究人员负责通过为此目的提供试验实验的结果,证明通过南部分析用5'和3'探针识别靶向ES细胞克隆的可靠方案。如果已经完成了适当的对照实验,PCR分析可能适用于分析。(致电Jan Parker-Thornburg了解有关证明PCR分析的进一步信息。)必须在启动基因靶向实验之前证明鉴定突变等位基因的说明策略。
Pronuileclear注射
我们的工厂已经生产了数千条原核注射成型生产线。对于标准的DNA结构,我们将生成三个DNA奠基人动物。虽然DNA通常可以被显示为与基因组合并,但基因可能会也可能不会表现出表达。并不总是能够预测转基因是否会在小鼠体内表达以及其表达的效果。因此,GEMF不能保证转基因的表达。研究人员负责通过提供用于此目的的初步实验结果,证明在单拷贝水平上识别检测转基因的可靠方案。GEMF将根据要求提供单份检测方案。
使用CRISPR / CAS9或其他基因编辑核酸酶通过经核注射靶向基因
GEMF将通过经核注射小鼠胚胎注射CRISPR / CAS9或其他基因编辑内切核酸酶的组分,以产生基因靶向动物,敲除和敲击动物。我们要求注射的组件由GEMF或由批准的公司生产(联系我们提出建议)。我们将每项目进行五天进行,但不能保证幼崽或有针对性的动物。请在启动项目之前联系Jan Parker-Thornburg,了解有助于该项目成功的详细信息。
胚胎冷冻保存
虽然胚胎冷冻保存是用于保护小鼠资源的有价值的工具,但某些小鼠菌株不适合该技术的严谨性。因此,必须知道要冷冻保存的应变的遗传背景。GEMF将一根冷冻胚胎和培养的秸秆过夜,以确保胚胎冷冻对于该特定的小鼠线是可行的。
精子冷冻保存
对于精子冷冻保存,调查员将进行预先交配雄性以鼓励新精子产生的时间表。每只雄性的冷冻精子将由IVF测试其受精能力。