鼠标资源设施
小鼠资源设施(MRF)于1999年加入GEMF，以满足小鼠试剂的需求。MRF储存了许多小鼠试剂，包括基因组DNA、用于构建DNA的质粒和用于超排卵的激素。此外，MRF还维持了一小群Cre和lacZ转基因小鼠以及其他报告小鼠。提供这些试剂的费用很少，以支付维护费用。
质粒
MRF储存了多种通常用于构建DNA以操纵小鼠基因组的质粒。这些质粒包括产生G418抗性的新霉素基因质粒、含有creo - loxp的质粒、含有FLP重组酶使用的FRT位点的质粒、含有LacZ的质粒以及其他各种有用质粒。
以下质粒可由研究者获得用于生成靶向结构物。选择的质粒的5微升(5-µl)等量将提供给研究者用于细菌转化。
PGK-Neo-bpA loxA
包含从PGK启动子中表达的新霉素抗性基因，该启动子含有牛生长激素poly A位点，两侧有lox P位点，易于去除。使用的矢量是pBluescript II KS(-)。方向性是从T3到T7启动子(A)。
PGK-Neo-bpA loxB
包含从PGK启动子中表达的新霉素抗性基因，该启动子含有牛生长激素poly A位点，两侧有lox P位点，易于去除。使用的矢量是pBluescript II KS(-)。方向性是从T7到T3启动子(B)。
pMC1TKbpA
包含一个TK磁带两侧的多克隆站点。艾伦·布拉德利报道。
PGK-Neo-bpA FRT
包含从含有牛生长激素poly A位点的PGK启动子中表达的新霉素抗性基因，其两侧为frt位点，用flp重组酶去除。
IRES-Cre-pA FRT2 PGK-Neo-bpA
在pBluescript II KS(-)中包含一个2.4 kb XhoI/SmaI片段，该片段含有质粒ires - crea - pa的ires - crea - pa基因，以及质粒FRT-PGK-Neo-bpA FRT-6的2.5 kb EcoRV/BamHI片段。新基因两侧有FRT位点，可以用flp重组酶去除。
PGK-hygro
含有PGK启动子表达的抗潮霉素基因。该基因的侧翼有多个克隆位点。
IRES-Cre-pA
在pBluescript II KS(-)中包含一个~1.0 kb的XhoI/BamHI片段和质粒pOG231中含有Cre polyA位点的~1.4 kb的BamHI/SalI片段。
pIRES-T-lacZ / loxP-Neo
包含一个在IRES中表达的tau-LacZ基因，以及一个在PGK启动子中表达的loxp侧的neo基因。LacZ基因和neo基因的两侧都有多克隆位点。
pPGK-puro-bpA-loxP
包含从PGK启动子中表达的嘌呤霉素抗性基因，该基因具有牛生长激素polyA位点，两侧有lox P位点，易于去除。
pOG231
含有Cre基因的质粒，从CMV启动子中表达，用于通用表达。Steve O'Gorman提供。
pCAGG-Flpe
将CMV启动子表达的flp重组酶质粒与Kozak共识序列相一致，以获得更高水平的表达。Francis Stewart报道。
成本:质粒不收费
鼠标的资源
MRF维持少量含Cre、GFP和lacz的小鼠，并将根据要求(仅)分发给MD Anderson的研究人员。乐动体育LDsports中国要确定哪些鼠标可用，请联系Jan Parker-Thornburg。
老鼠不能被送到外部调查员那里。不过，GEMF将乐于向外部调查人员提供订购信息。
CMV-Cre老鼠
转CMV-Cre基因的小鼠。Cre在所有细胞中都有表达。这些小鼠的背景为C57BL/6。
R26R老鼠
用于报道Cre表达的小鼠。一个ROSA26- loxp - neo - loxp - lacZ基因被定位到ROSA26位点(Soriano P.[1999]用ROSA26 Cre报告菌株进行lacZ基因的推广表达。自然遗传学21,70-71。)如果Cre重组消除了Neo抗性基因，则lacZ基因在所有细胞中都有高水平的组成性表达。这些小鼠在C57BL/6:129杂交背景下。
Zp3-Cre老鼠
含Zp3启动子表达的Cre重组酶基因的C57BL/6转基因小鼠。Cre仅在第一次减数分裂完成前生长中的卵母细胞中表达。(Lewandoski M, Montzka Wassarman K, Martin GR [1997] Zp3-cre，一种在雌性生殖系中特异性激活或灭活loxp侧靶基因的转基因小鼠系。当代生物学7,148-151。)
flp老鼠
用于Flp高表达重组酶的小鼠删除株。利用位点特异性重组酶FLP (Farley FW, Sorioano P, Steffen LS, Dymecki SM[2000])的增强版靶向ROSA26-基因。FLPeR (flipper)小鼠广泛表达重组酶。《创世纪》28,106 - 110)。FLPe在所有细胞中呈结构性高水平表达。这些老鼠在129的背景下。
常染色体GFP
携带由鸡-肌动蛋白启动子和CMV中期早期增强子驱动的绿色荧光蛋白的小鼠。“这种菌株可以用作荧光标记细胞或组织的来源。该转基因在所有有核胚胎组织中都有表达。虽然无处不在，但不同器官的表达水平不同”(杰克逊实验室网站:菌株003115)。该菌株的参考是Hadjantonakis AK, Gertsenstein M, Ikawa M, Okabe M, Nagy a(1998)。绿色荧光ES细胞的种系传递产生绿色荧光小鼠。动力机械。Dev。76年,79 - 90。
价格:每只鼠标收费39美元。对于多余的家畜(非转基因的，退休的饲养者)每只老鼠收取17美元。
供应
GEMF可为胚胎干细胞培养、胚胎运输和超排卵提供少量化学物质。我们也可以为C57BL/6和BL/6白化菌株提供培养囊胚的桑葚胚。每一种化学品的成本取决于生产它的成本。
培训
GEMF可以培养有限数量的人进行原核注射和ES细胞培养。这通常是一对一的培训，需要学员投入大量的时间。为了避免交叉污染，受训者在进行日常训练之前不能使用自己的小鼠。
联系
试剂登录https://mdanderson.ilabsolutions.com，注册一个帐户，然后去网站请求服务。