服务
由于许可协议,shRNA和ORF试剂仅供德克萨斯大学MD安德森癌症中心的研究人员使用。乐动体育LDsports中国如果您有任何疑问,请联系孙宇通博士ysun2@mdanderson.org。
个体克隆分布作为甘油股和质粒
FGC以甘油库存(含有8%甘油的LB培养基)或质粒(MIDI-PREP,> 100ug)的形式分配单独的SHRNA或ORF。在释放到研究人员之前,通过部分测序验证ORF质粒。乐动体育LDsports中国周转时间为甘油库存为2-4个工作日,质粒为3-5个工作日。
个体幸免或复古病毒包装和转导
FGC进行质粒纯化,载体或复古病毒包装和滴度测量。如果研究人员向我们提供自己的病毒载体,我们还开展此服务。乐动体育LDsports中国周转时间为4-6周。
自定义亚库(甘油存量、质粒和/或慢病毒)
根据研究人员的需要,FGC将“精挑细选”96乐动体育LDsports中国孔板格式的shRNA或ORF甘油库存。根据研究人员的要求,我们将以96孔乐动体育LDsports中国板的形式纯化质粒(转染兼容),并/或在96孔板中进行慢病毒包装。
利用CRISPR/Cas9技术建立体细胞基因敲除细胞系
FGC将提供多个体细胞基因敲除细胞克隆,并将通过PCR (HR方法)或测序(NHEJ方法)验证基因敲除。要求:1)细胞系能耐受克隆选择;2)靶基因缺失不会导致细胞死亡或明显降低细胞增殖率;3)细胞系与转染或转导兼容;4)Western blots(蛋白质),qPCR(非编码rna)或其他检测方法可以检测靶基因的缺失。
项目服务
FGC的工作人员将花费一些精力帮助MD安德森癌症中心的研究人员优化筛查分析,执行筛查和数据分析。乐动体育LDsports中国
其他服务
定制shRNA或ORF子克隆
FGC子克隆定制shrna到pLKO。1个载体,pGIPZ或pTRIPZ载体,或ORF成表达载体。
共享设备
以下仪器对MD安德森研究人员开放:机器人(Tecan EVO100和EVO200)和高含量成像系统(乐动体育LDsports中国ImageXpress micro和ultra)。
预shRNA库
FGC分配以下预先组装的ShRNA文库,靶向以下基因家族:人类激酶;人磷酸酶;和人类e3切割酶。此外,我们还分发Cellecta人类基因组汇集的ShRNA文库(Lentivirus)。
TKO V3 CRISPR图书馆
FGC分销TKO V3 Crispr图书馆(在多伦多大学的Moffat博士博士,https://www.addgene.org/pooled-library/moffat-crispr-knockout-tkov3/)。