组织形态学
按照ASBMR组织形态形态命名委员会(5)建立的指导方针,以单位测量和表达所有骨特异性参数。对于每个实验,将同时分析实验和对照样品,每组至少为15只动物,以最大限度地减少遗传变异性的影响。
最初,将分析仅通过von Kossa试剂(染色黑色矿化骨基质)治疗的每试样的四个部分。对于椎骨,将分析L3和L4。使用现有的半自动模式存在于骨质统计系统中,我们将测量三个参数:
骨量
计算为总骨髓体积所占的骨小梁(BV / TV,%)
小梁数
评价为存在小梁在用于骨体积分析的领域(数Tb.N,毫米-1)
小梁厚度
计算作为本小梁在用于骨体积分析领域的平均厚度(Tb.Th,微米)
这些参数将提供实验标本中骨量增加或降低的存在的可靠估计。是否存在这种表型,将评估额外分析的必要性。细胞计数和动态组织形态学需要处理特定染色的附加部分和/或非常耗时。这些额外的分析只会根据项目调查员要求进行。
细胞计数和动态组织形态测定将来自两个非相邻的部分得到高放大倍数图像的30-35相邻场来执行。
测量结果如下:
成骨细胞将在甲苯胺蓝染色的载玻片作为在骨表面以簇对准蓝色/灰色立方细胞计数。两者成骨细胞数量(N.Ob / BPM,毫米-1)和成骨细胞表面(OB。S / BS,%)数据将被提供给研究者。
骨核糖籽将计入测定陷阱活性作为捕获阳性多核细胞的载玻片。骨核苷酸号(N.oc / BPM,mm-1)和破骨细胞表面(Oc.S / BS,%)数据将被提供给研究者。
表征骨骼形成的两个动态参数将提供给调查人员。矿物沉积速率(MAR,毫米/天)将作为两个连续的钙黄绿素的标签由标签周期之间的时间间隔划分的中点之间的距离来测量。的骨形成率(BFR / BS,毫米3./毫米2/天)将计算为新形成的矿化骨量的表达。