服务
DNA提取
可以从全血、新鲜或冷冻组织、培养细胞和存档组织中提取DNA。方法取决于组织的来源。
从FFPE组织和肿瘤组织解剖DNA提取
- DNA纯化的起始材料应是新切下的FFPE组织切片,最多3个切片,每个切片的厚度不超过10正络m,表面积不超过250 mm2可以在一种制剂中组合。
- 以H&E切片为模板,标记肿瘤组织区域,即可解剖肿瘤组织。
从唾液中提取DNA收集在容器Oragene®
- 唾液的推荐量为2毫升该Oragene的音量®在试剂盒中的DNA溶液在2.0毫升因此2毫升唾液加上Oragene的总体积®DNA溶液为4.0 ml。
- 完整的唾液样本应在30分钟和Oragene内收集®DNA试剂盒应立即封端。等待超过30分钟可以降低DNA的产量和质量。
- 混合Oragene®DNA /在Oragene唾液样品®DNA瓶倒置。
从血液相关的样本的DNA提取
- 如果可能的话,收集血液在EDTA管,以减少DNA降解。然而,其他的抗凝血剂,ACD(柠檬酸盐)也可被成功地使用。
- 从血液样品分离的DNA的量是高度依赖于白血细胞的数量存在于所述样品和血液贮存条件英寸平均而言,DNA的350ug从新鲜血液样品的分离10毫升。冷冻于-80样本℃下通常表现出在DNA产率15%的下降。为获得最佳结果,血液应储存在4℃小于5天或在-80℃下在同一天被冻结。
从全血提取DNA
- 用于短期存储,保持新鲜抽取的血液样本在4℃下不超过5天。为了达到最佳效果,新鲜的血液样本应尽快收集后输送到核心越好。
- 若要长期保存,采血后应尽快在-80℃保存。
- 核心设施不建议在-20℃下储存的血液样本的任何时间长度。血液贮存在该温度低至3天导致降低的DNA产量。存储在该温度下2-4周导致一半的产率,为所存储的相同的样品。
从血沉棕黄层中提取DNA
- 淡黄色的上衣和白血细胞颗粒可以存储处理之前冻结在-80°C。
从细胞沉淀中提取DNA
- 新鲜和冷冻的细胞沉淀可以用于提取。
血液、全血、褐皮和细胞颗粒送检
请安全管提交样品。直接带来的岩芯可以放置在位于实验室冰箱。请在核心,如果他们需要被存储在-80℃下直接落样品给技术人员。
从新鲜冷冻组织或细胞颗粒中提取DNA、RNA和蛋白质
- 固体组织或培养细胞样品应立即处理或冷冻,以减少内源性核酸酶的活性。
- 切片组织成块不超过5毫米厚。细胞应沉淀。样品必须立即进行快速冷冻在液氮中或在低温恒温器。
- 如果不需要形态保存,然后将在无限期直到DNA或RNA分离-80℃冰箱中的样品。
全血处理的淋巴细胞和浆
- 全血应保存在ACD管和EDTA管中。
- 对于血浆和全血,尽可能将真空瓶完全填满,以消除抗凝剂或防腐剂的稀释,并立即将试管轻轻彻底倒置5 - 10次,将血液混合。
DNA质量检查凝胶电泳
- DNA应贮存在TE减少退化的机会。样本可以用浓度低至5NG / UL进行分析。
- 使用Pyromark Assay Design软件设计引物扩增用于焦磷酸测序成功的PCR产物。需要进行生物素改性。无菌PCR制备在AirClean 600 PCR工作站(AirClean Systems)进行。
DNA定量通过PicoGreen检测结果
- DNA应储存在TE或低TE和来自多个冷冻解冻作为该受保护会导致产生低的PicoGreen浓度碎片。
- 由于该测定的性质(仅检测双链DNA),的PicoGreen读数经常会导致显著较低浓度时相比光度法(260/280)的读数。通过的PicoGreen测定该DNA定量是必要的敏感下游应用如GoldenGate基因分型和下一代测序。
与用户协商
- 我们提供整个样品处理到我们的用户免费咨询。在此之前的项目开始,我们鼓励用户联系BER(联系人:顾健博士,主任),讨论他们的研究需求。乐动体育LDsports中国然后BER工作人员将提供与样品收集和编写指南的用户。对于谁拥有了样品处理特殊需求的用户,协商后,我们将开发适合他们的需求如果可能的话修改后的服务。此外,服务开始之前被提供的服务和周转时间估计值的概览。
价格单
系统服务 | 2015年价格 |
---|---|
从血液中提取DNA | 30美元/血液样本 |
从唾液DNA提取 | $第22 /唾液样品 |
同时DNA / RNA /蛋白质的提取 | 95美元/样本 |
RNA从新鲜冷冻的组织 | 50美元/样本 |
冷冻组织DNA | 28美元/样本 |
来自FFPE组织的DNA(最多3片/样本) | $ 38 /样本 |
额外的FFPE幻灯片# | $ 0.50 /幻灯片 |
全血处理 | 6美元/样本 |
凝胶电泳 | 1.50美元/样本 |
Picogreen | 的88个样本$ 152 /板 |
从新鲜冷冻组织中提取蛋白质 | $ 18 /样本 |